Ključna razlika - Flow Cytometry vs FACS

V okviru celične teorije so celice osnovna strukturna in funkcionalna enota vseh živih organizmov. Razvrščanje celic je metodologija, ki se uporablja za ločevanje različnih celic glede na fiziološke in morfološke značilnosti. Lahko so medcelične ali zunajcelične značilnosti. Medsebojno delovanje DNA, RNA in beljakovin velja za medcelične interaktivne lastnosti, medtem ko se oblika, velikost in različne površinske beljakovine štejejo za zunajcelične lastnosti. V sodobni znanosti so metodologije razvrščanja celic pomagale različnim preiskovanjem bioloških študij in tudi pri oblikovanju novih načel z raziskovanjem medicine. Razvrščanje celic poteka po različnih metodologijah, ki vključujejo tako primitivne z manj opreme kot napredne tehnološke metodologije z uporabo prefinjenih strojev. Pretočna citometrija, fluorescentno razvrščanje celičnih celic (FACS), selekcija magnetnih celic in razvrščanje posameznih celic so glavne uporabljene metodologije. Pretočna citometrija in FACS sta razvita za razlikovanje celic glede na njihove optične lastnosti. FACS je specializirana vrsta pretočne citometrije. Pretočna citometrija je metodologija, ki se uporablja med analizo heterogene populacije celic glede na različne molekule, velikost in volumen celic, ki omogoča preiskavo posameznih celic. FACS je postopek, s katerim vzorčno mešanico celic razvrstimo glede na njihove značilnosti sipanja svetlobe in fluorescence v dve ali več posod. To je ključna razlika med pretočno citometrijo in FACS.

VSEBINA

1. Pregled in ključne razlike 2. Kaj je protočna citometrija 3. Kaj je FACS 4. Podobnosti med protočno citometrijo in FACS 5. Primerjava ob strani - Flow Cytometry vs FACS v tabeli 6. Povzetek

Kaj je Flow Cytometry?

Pretočna citometrija je metoda, ki se uporablja za preučevanje in določanje izraženosti medceličnih molekul in celične površine ter za določitev in karakterizacijo različnih vrst celic. Uporablja se tudi za določanje volumna celice in velikosti celic ter za oceno čistosti izoliranih subpopulacij. To omogoča vrednotenje več parametrov posameznih celic v istem času. Pretočna citometrija se uporablja za merjenje intenzitete fluorescence, ki nastane zaradi fluorescentno označenih protiteles, ki pomagajo prepoznati beljakovine ali ligande, ki se vežejo na pridružene celice.

Na splošno protočna citometrija vključuje večinoma tri podsisteme. To so fluidiki, elektronika in optika. V protočni citometriji je na voljo pet glavnih komponent, ki se uporabljajo pri razvrščanju celic. To so pretočna celica (tok tekočine, ki se uporablja za prevoz in uskladitev celic za proces optičnega zaznavanja), merilni sistem (lahko so različnih sistemov, vključno z živosrebrnimi in ksenonskimi žarnicami, vodno hlajeno z visoko močjo oz. laserji z nizko močjo z zračnim hlajenjem ali diodni laserji), ADC; Analogno digitalni pretvornik, ojačevalni sistem in računalnik za analizo. Pridobitev je postopek, s katerim se podatki zbirajo iz vzorcev s pomočjo protočnega citometra. Ta postopek posreduje računalnik, ki je povezan s pretočnim citometrom. Programska oprema, prisotna v računalniku, analizira informacije, ki jih računalnik napaja s pretočnega citometra. Programska oprema ima tudi možnost prilagajanja parametrov poskusa za nadzor pretočnega citometra.

Kaj je FACS?

V kontekstu protočne citometrije je sortiranje s celicami s fluorescenco (FACS) metoda, ki se uporablja pri diferenciaciji in razvrščanju vzorca mešanice bioloških celic. Celice so ločene od dveh ali več posod. Metoda razvrščanja temelji na fizikalnih značilnostih celice, ki vključuje značilnosti razpršitve svetlobe in fluorescenčne celice. To je pomembna znanstvena tehnika, ki jo lahko uporabimo za pridobitev zanesljivih kvantitativnih in kvalitativnih rezultatov fluorescenčnih signalov, ki se oddajajo iz vsake celice. Med FACS sprva predhodno dobljeno mešanico celic; suspenzija je usmerjena v sredino ozkega toka tekočine, ki hitro teče. Tok tekočine je zasnovan tako, da loči celice v suspenziji glede na premer vsake celice. Na tok suspenzije se uporablja mehanizem vibracij, ki povzroči nastanek posameznih kapljic.

Sistem je umerjen, da ustvari eno kapljico z eno celico. Tik pred nastankom kapljic se pretočna suspenzija premika po aparatu za merjenje fluorescence, ki zazna fluorescenco, značilno za vsako celico. Na mestu tvorbe kapljic se postavi električni polnilni obroč, ki ga napolni obroč pred meritvijo intenzitete fluorescence. Ko se kapljice tvorijo iz toka suspenzije, se znotraj kapljic ujame naboj, ki nato vstopi v sistem elektrostatičnega odklona. Glede na polnjenje sistem preusmeri kapljice v različne posode. Način uporabe polnjenja se razlikuje glede na različne sisteme, ki se uporabljajo v FACS. Oprema, ki se uporablja v FACS, je znana kot sorter s celicami, ki se aktivira s fluorescenco.

Kakšna je podobnost med pretočno citometrijo in FACS?


  • Pretočna citometrija in FACS sta razvita za razlikovanje celic glede na njihove optične lastnosti.

Kakšna je razlika med protočno citometrijo in FACS?

Povzetek - Flow Cyometetry vs FACS

Celica je osnovna strukturna in funkcionalna enota vseh živih organizmov. Razvrščanje celic je postopek, s katerim se celice izolirajo in razlikujejo v različne kategorije glede na njihove znotrajcelične in zunajcelične lastnosti. Pretočna citometrija in FACS sta dve pomembni metodologiji razvrščanja celic. Oba procesa sta razvita za razlikovanje celic glede na njihove optične lastnosti. Pretočna citometrija je metodologija, ki se uporablja med analizo heterogene populacije celic glede na različne molekule, velikost in volumen celic, ki omogoča preiskavo posameznih celic. FACS je postopek, s katerim vzorčno mešanico celic razvrstimo glede na njihove značilnosti sipanja svetlobe in fluorescence v dve ali več posod. To je razlika med Flow Cytometry in FACS.

Prenesite PDF različico Flow Cytometry vs FACS

Lahko prenesete PDF različico tega članka in jo uporabljate za namene brez povezave, kot je navedeno v navodilu. Prosimo, da tukaj prenesete PDF različico Razlika med Flow Cytometry in FACS

Referenca:

  1. Pretočna citometrija (FCM) / FACS | Fluorescentno razvrščanje celic (FACS). Dostopno 22. septembra 2017. Na voljo tukaj Ibrahim, Sherrif F. in Ger van den Engh. "Pretočna citometrija in razvrščanje celic." SpringerLink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1. januarja 1970. Dostopno 22. septembra 2017. Na voljo tukaj

Vljudnost slik:


  1. 'Citometer' med Kierano - lastno delo, (CC BY 3.0) prek Wikimedije Commons 'Fluorescentno razvrščanje celic (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Razvoj sistema in vitro za proučevanje interakcij Equus caballus IgE s svojim visoko afinitetnim receptorjem FcεRI (doktorska disertacija), Univerza v Sheffieldu (CC BY-SA 3.0) prek Commons Wikimedia